Suora immunofluoresenssin havaitseminen

Kudosrakenteiden, vasta-aineiden ja patogeenien todisteet immuunimerkinnöillä ovat suosittuja, nykyaikaisia ​​ja tarkkoja. Immunofluoresenssi tarkoittaa immuunimerkintää valmistetuilla fluoresoivilla vasta-aineilla, joiden on tarkoitus hehkua UV-valossa.

tällä Suora immunofluoresenssin havaitseminen substraatti tutkitaan suoraan valoisilla vasta-aineilla, ilman primaarisia vasta-aineita tai keinotekoisia antigeenejä.

Mikä on suora immunofluoresenssin havaitseminen?

Kasvainspesifiset antigeenit tuumorikudoksessa voidaan havaita suoraan immunofluoresenssilla. Tämän avulla on mahdollista selvittää, mistä olemassa olevat etäpesäkkeet tulivat kehosta.

Suora immunofluoresenssin havaitseminen on diagnostinen menetelmä, joka perustuu immunologian, immunovärjäytymisen ja immunohistokemian tuntemukseen. Tässä keskitytään vasta-aineiden kykyyn sitoutua kudoksen tiettyihin pisteisiin tai seerumin antigeeneihin. Nämä paikat ovat epitooppeja.

Biokemiallisessa diagnostiikassa on keinotekoisia vasta-aineita tai jäljitteitä (singulaarinen: jäljittelevä), jotka mahdollistavat näiden vasta-aine-antigeeni-sidosten merkitsemisen fluoresenssilla tai radioaktiivisuudella. Keinotekoiset vasta-ainekonjugaatit sitoutuvat toisaalta epitooppeihin ja toisaalta niillä on fluoresoiva merkki immunofluoresenssin tapauksessa. Tämä on vaihtoehto radioaktiivisten markkerien käyttämiselle. Erityinen immunofluoresenssin välittömässä havaitsemisessa verrattuna epäsuoraan havaitsemiseen on, että vasta-aine, joka sitoutuu tutkitun materiaalin antigeenin epitooppiin, edustaa myös vasta-ainekonjugaattia fluoresoivan markkerin kanssa. Lisävasta-aineet eivät ole välttämättömiä suoralle havaitsemiselle.

Fluoreseiinia, joka paistaa UV-valossa, ja fluoreseiini-isotiosyanaattia (FITC) käytetään väriaineina keinotekoisten vasta-ainekonjugaattien valmistamiseksi immunofluoresenssissa. Toistaiseksi se on hieman monimutkainen, mutta suora immunofluoresenssin havaitseminen on tavanomainen lääketieteellisen laboratorion diagnosointimenetelmä moniin lääketieteellisiin kysymyksiin. Fluoresoivan väriaineen vasta-aineet ovat valmiita myytäväksi.

Toiminta, vaikutus ja tavoitteet

Suora immunofluoresenssi-detektio on saatavana kudostutkimuksiin tiettyjen kudoksen rakenteiden värjäämiseksi. Mutta niitä on saatavana myös yksittäisille soluille. Virtaussytometrialla on tässä tärkeä rooli. Lopuksi on kiinteän ja nestemäisen faasin immunomäärityksiä. Kudosten immunofluoresenssitutkimukset ovat erityisen tärkeitä onkologiassa, ts. Syöpäsairauksien lääketieteellisessä hoidossa.

Kasvainspesifiset antigeenit tuumorikudoksessa voidaan havaita suoraan immunofluoresenssilla. Nämä kasvainten kudosnäytteiden tutkimukset ovat usein tärkeitä, jotta voidaan selvittää, mistä olemassa olevat etäpesäkkeet ovat peräisin kehosta, tai jotta voidaan arvioida, onko kasvain hyvänlaatuinen vai pahanlaatuinen. Yksittäisten solujen tutkimista suoralla immunofluoresenssitunnistuksella käytetään virusantigeenien, bakteeriantigeenien ja muiden epitooppien löytämiseen.

Voit esimerkiksi selvittää, tarttuvatko solut viruksella ja missä infektiosyklin vaiheessa solut ovat. Nimi FACS (= fluoresenssilla aktivoitu solujen lajittelu) on erittäin tehokas virtaussytometrinen menetelmä, jossa fluoresenssilla merkityt solut jaetaan eri koeputkiin värityypistä riippuen. Tämä menetelmä on tärkeä immunologiassa, hematologiassa ja tartuntatauteissa.

Immunofluoresenssimmuunimääritykset mahdollistavat ympäristötoksiinien, geneettisesti muunnettujen organismien ja tiettyjen lisäaineiden suoraan havaitsemisen ruuissa. Tässä kokeellisessa järjestelyssä on aina kiinteä ja nestemäinen faasi. Lukuisat patogeenit, mukaan lukien HIV-virus, joka aiheuttaa aidsia, voitaisiin myös havaita suoraan. Havaittaessa tarttuvia ja autoimmuunisairauksia on kuitenkin usein kysymys vasta-aineiden havaitsemisesta antigeenien sijaan. Nämä ovat kehon immuunijärjestelmän muodostamia puolustusmolekyylejä. Tässä esitetyn määritelmän mukaan sellaiset todisteet eivät silloin ole suoria todisteita, koska fluoresoivat vasta-aineet eivät liity suoraan kehon omiin antigeeneihin, vaan testijärjestelyn antigeeneihin.

Nämä antigeenit kokeellisessa järjestelyssä kytketään puolestaan ​​kehon omiin vasta-aineisiin. Tavallisten infektioiden, esimerkiksi HIV-virusten ja klamydian, suoraa immunofluoresenssitutkimusta käytetään vain erityisissä havaitsemis- ja vahvistustesteissä. On olemassa testejä monille muille sairauksille. Useimmissa tilanteissa vasta-aineiden epäsuora havaitseminen sopii paremmin tartuntatauteihin, koska kehon omalla immuunijärjestelmällä on nerokas kyky muistaa aiemmat infektiot. Muissa tilanteissa antigeenien suora havaitseminen ja vasta-aineiden epäsuora havaitseminen täydentävät toisiaan. Jälkimmäiset osoittavat, että tartunta on tapahtunut aiemmin, kun taas ensimmäiset antavat tarkempia tietoja taudinaiheuttajan aktiivisuuden nykytilasta.

Löydät lääkkeesi täältä

➔ Lääkkeet puolustus- ja immuunijärjestelmän vahvistamiseksi

Riskit, sivuvaikutukset ja vaarat

Suoraan immunofluoresenssitunnistukseen, kuten kaikkiin lääketieteellisiin todisteisiin, liittyy kaksi riskiä: väärän, positiivisen tuloksen ja väärän, negatiivisen tuloksen riski. Virheelliset, positiiviset tulokset aiheuttavat potilaalle psykologista vaivaa ja suurta stressiä.

Siksi positiivisiin tuloksiin lisätään lisätestausmenetelmiä, varsinkin jos diagnoosi johtaa rajuihin elämänmuutoksiin. Väärän, kielteisen tuloksen riski on, että potilas ei oppia hyvissä ajoin omaan terveyttään ja ehkä jopa kansanterveyteen kohdistuvista uhista. Siksi on hyvä tehdä paljon tutkimusta ja tehdä ja tarjota suuri määrä erilaisia ​​immunofluoresenssisuoraa ilmaisua myytäväksi. Yhdessä muiden sairauksien ja patologioiden suorien ja epäsuorien havaitsemismenetelmien kanssa tämä lisää diagnoosin tarkkuutta.

Suora havaitseminen perustuu vasta-ainekonjugaattiin, joka toisaalta sitoutuu antigeenien epitooppeihin ja toisaalta aiheuttaa myös fluoresenssin. Siksi tällaista tuotetta käytetään vain yhden tyyppisissä testimenetelmissä eikä sitä käytetä muun tyyppisissä testimenettelyissä.Tämä on tärkeä menettelyllinen ero epäsuoriin todisteisiin, joissa fluoresoivia vasta-aineita edeltävät primaariset vasta-aineet epitooppien sitoutumiseksi. Vasta-ainekonjugaatti soveltuu siksi erilaisiin kokeisiin. Tämä menettelyllinen ero on erilainen kuin vasta-aineiden epäsuoran havaitsemisen ja antigeenien suoran havaitsemisen välinen lääketieteellinen ero.